Publicação científica trimestral do CREMERJ - número 3 - 2022

64 Doença associada à infecção pelo Clostridioides difficile . Atualização Nelson Gonçalves Pereira et al. Med. Ciên. e Arte , Rio de Janeiro, v.1, n.3, p.49-93, jul-set 2022 de tecido inocula-se o mesmo filtrado junto com anticorpos neutralizantes contra as toxinas A e B do Cd, os quais evitarão o seu efeito citopático, se o resultado for positivo. A sensibilidade (S) deste método varia de 65% a 93% e a especificidade (E) é de 98%. Este é um dos exames considerados padrão-ouro e tem sido aperfeiçoado com o uso de anticorpos monoclonais e con- segue separar a simples colonização das infecções verdadeiras. Apesar disto é um teste complexo, trabalhoso e demanda em média 2 a 4 dias para fornecer um resultado definitivo, o que é muita demora para as necessidades do paciente e por isto pouco usado na assistência. 6.3. Cultura toxinogênica Consiste no isolamento do Cd a partir do cultivo de amostras de material fecal; este processo não diferencia as cepas produtoras de toxinas das não toxinogênicas. Para esta finalidade necessita-se de uma segunda fase em que se pode demonstrar a produção das toxinas A e B do Cd pela técnica do imunoensaio enzimático no sobrenadante da cultura; também se pode demonstrar a presença dos genes responsáveis pela produção das toxinas A e B, pela técnica do PCR. (29) A S varia de 95% a 100% e a E, de 96% a 100%. (9) Este exame, apesar de também ser considerado padrão-ouro, necessita de estrutura de laboratório de microbiologia, é complexo, trabalhoso e demorado para a prática clínica e por isto muito pouco utilizado no diagnóstico. Esta técnica não discrimina entre o portador assintomático e a infecção atual pelo Cd. (36) 6.4. Pesquisa de glutamato desidrogenase (GDH) do C. difficile AGDH é uma enzima básica, constituti- va, que é encontrada em grande quantidade na maioria das cepas do Cd. É pesquisada pela técnica de ensaio imunoenzimático (EIA). Este exame não separa as cepas toxinogênicas das não patogênicas, entre- tanto documenta a presença no Cd. Tem baixo custo, é de fácil execução e rápido, demorando menos de 1 hora. A sensibili- dade varia entre 71% e 100% e a especi- ficidade, de 67% a 99%. O valor preditivo negativo (VP-) é alto, entre 95% e 100%, enquanto o valor preditivo positivo (VP+) é baixo, variando de 34% a 50%. A maioria dos autores considera a GDH um método que deveria ser usado somente como tria- gem, sendo bom para afastar o diagnóstico devido ao alto VP-; recomenda-se que os casos positivos pelo GDH devam ser se- guidos de um segundo exame, em geral o PCR ou a pesquisa de toxinas A e B pelo EIA, métodos de boa especificidade e que demonstram a patogenicidade da bactéria, portanto diagnóstico em duas ou três etapas que é proposto na atualidade por vários guidelines (Figuras 2 e 3, adiante). 6.5. Pesquisa das toxinas A e B Em geral se utiliza a técnica de EIA. É o método tradicional mais conhecido para

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